کلمات کلیدی: هوش معنوی، رفتار شهروندی سازمانی، معلمان، متوسطه
فصل اول
کلیات تحقیق
۱-۱- مقدمه
مفهوم هوش، تاریخی طولانی دارد، شاید به اندازه خود انسان قدمت داشته باشد. حتی قدیمیترین داستانهای مکتوب در تاریخ بشری، مثل حماسه گیلگمش^[۱]، بعضی قهرمانان داستان را « عاقل» و بعضی دیگر را، برای اینکه مؤدب باشیم، کمتر عاقل توصیف کردهاند. داستانهای انجیل از باهوشی نمونه های بسیار واضحی ارائه میدهند، مثل حضرت سلیمان، نمونه های حماقت را هم آوردهاند، مثل حماقت همسایههای نوح و خود فرعونهای مصر. به نظر میرسد که ما انسانها مدتهاست این عقیده را پذیرفتهایم که بعضی مردم در تصمیمگیری بهتر از بقیه هستند. این افراد احتمالاً همان اطلاعات را در اختیار دارند که دیگران دارند، اما وقتی به سبک و سنگین کردن، ارزیابی و پردازش اطلاعات میپردازند به نتایجی میرسند که خیلی بهتر از نتایج دیگران است(دیویس^[۲]،۱۳۸۴، ص۱۴۸).

( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

در دهه های اخیر مفهوم معنویت و کاربردهای آن در دنیا و بخصوص در دنیای غرب اهمیت زیادی یافته است به طوری که مفاهیمی همچون خدا، مذهب، معنویت و غیره که موضوعاتی خصوصی قلمداد میشدند وارد تحقیقات علمی در حوزه علوم انسانی شدهاند. درواقع در کنار علاقه فزاینده به هوش عاطفی، ترکیب دو مفهوم معنویت و هوش در مفهوم جدید هوش معنوی^[۳] نیز مورد توجه قرارگرفته است( زوهر و مارشال^[۴]، ۲۰۰۴).
مطالعه رفتار افراد در محیطهای کاری از دیر باز مورد توجه اندیشمندان علوم مدیریت بوده است و با ظهور رشته رفتار سازمانی در سالهای نخست دهه ۱۹۶۰، در این امر جدیت بیشتری به عمل آمد. بسیاری از مطالعات صورت گرفته، سعی در تقسیمبندی رفتارها و علل بروز آنها داشتهاند. مباحثی نظیر: ادراک، انگیزش، تعهد سازمانی و غیره ازجمله مواردی هستند که به بررسی ریشه بسیاری از رفتارهای آدمی درمحیط کار میپردازد. اما مبحث جدیدی که در دو دهه اخیرعلاوه بر رفتارشناسان، توجه روانشناسان و جامعه شناسان را نیز به خود جلب نموده است؛ رفتار شهروندی سازمانی^[۵] نام دارد( ملک اخلاق و همکاران، ۱۳۸۸).
دراین فصل به بیان مسئله، اهمیت و ضرورت تحقیق، اهداف، سوالات، فرضیه ها، تعاریف مفهومی و عملیاتی تحقیق پرداخته شده است .
۱-۲- بیان مسئله تحقیق
به دنبال مطرح شدن مفاهیم روانشناسی هوش شناختی و هوش هیجانی در محیطهای کاری، بررسیهای متعددی نشان داد که افراد با چیزی بیشتر از جسم، فکر و احساسات، وارد دنیای کاری میشوند، آنها استعداد شخصی و روح منحصر به فرد خود را به همراه میآورند( لیگ^[۶]، ۱۹۹۷، به نقل از ساغروانی، ۱۳۸۸).
به نظر میرسد سازمانهای آموزشی و مدارس برای حفظ حیات و کارکرد خود نیازمند کارکنان و معلمانی با هوش عمیقتر و جدیدتر میباشند تا به وسیله آن بتوانند به نحو اثربخشتری به وظایف خود عمل کنند در حال حاضر دیگر بهرههوشی و ضریب هوش هیجانی پاسخگوی همه نیازها نیست بلکه انسانها به عامل سومی که هوش معنوی نامیده میشود نیاز دارند( چریر^[۷]، ۲۰۰۴؛ به نقل از نداف و همکاران، ۱۳۸۹).
مجموعهای از ظرفیتهای عقلی که به آگاهی کامل و کاربرد انطباقی از جنبه های معنوی و جهان مافوق وجودی شخص کمک میکند و منجر به خروجیهایی مانند تفکر وجودی عمیق، افزایش معنا، شناسایی عالم مافوق و سلطه حالتهای معنوی میشود (کینگ^[۸]، ۲۰۰۸).
کینگ هوش معنوی را دارای چهار بعد میداند که عبارتند از:
تفکرانتقادی وجودی^[۹]: توانایی اندیشیدن به حقیقت وجود، هستی، زمان ، مرگ و دیگر موضوعات ماوراء طبیعی اشاره دارد.
آگاهی متعالی^[۱۰]: توانایی شناخت ابعاد برتر و متعالی خود، دیگران و جهان مادی درزمان بیداری و هوشیاری است.
معناسازی شخصی^[۱۱]: توانایی ساخت مقصود شخص و هدف موجود در همه تجارب ذهنی و جسمانی شامل قابلیت ایجاد و مسلط شدن به هدف زندگی است.
گسترش خودآگاهی: توانایی ورود به سطوح و حالات معنوی و فراهوشیاری و همچنین خروج از آن با اراده فرد میباشد.
موسسات آموزشی در عصر حاضر برای مواجهه با چالشها و شرایط پیچیده، به معلمانی نیاز دارند که به طور داوطلبانه و اختیاری رفتار میکنند و برای موفقیت مدرسه، از هیچ تلاشی فروگذار نیستند( ویگودا و گادوت^[۱۲]، ۲۰۰۷). این نوع رفتارها که از انتظارات رسمی فراتر رفته، اما برای بقای سازمان ضروری هستند با عنوان رفتار شهروندی سازمانی مطرح میشوند( بولگر و سومچ^[۱۳]، ۲۰۰۴).
ارگان(۱۹۸۳) بیان میکند رفتار شهروندی سازمانی، رفتاری آگاهانه، اختیاری و فراوظیفهای است که در افزایش اثربخشی عملکرد سازمان مؤثر است، ولی به طور مستقیم یا غیرمستقیم به وسیله سیستم پاداش رسمی سازمان مورد تقدیر قرار نمیگیرد( مارکوزی و زین^[۱۴]، ۲۰۰۴).
معتبرترین تقسیمبندی رفتار شهروندی سازمانی توسط ارگان ارائه شده است که عبارتند از:
آداب اجتماعی: به عنوان رفتاری است که توجه به مشارکت در زندگی اجتماعی سازمانی را نشان میدهد.
وجدانکاری: رفتاری است که فراتر از الزامات تعیین شده به وسیله سازمان از محیطکار میباشد.
نوع دوستی: عبارت است از کمک کردن به همکاران در عملکرد مربوط به وظایفشان و یا همکارانی که دارای مشکلات کاری هستند.
جوانمردی: عبارت است از تمایل به شکیبایی در مقابل مزاحمتهای اجتنابپذیر و اجحافکاری بدون اینکه شکوه و شکایتی داشته باشد.
نزاکت و احترام: درباره اندیشیدن به اینکه چطوراقدامات و رفتارهای فرد بر دیگران تأثیر میگذارد.
علیرغم اهمیت و نقش حساس رفتار شهروندی سازمانی در تمامی سازمانها، شواهد موجود نشان میدهد در مدارس، کمتر به آن توجه شده است( دیپائولا و همکاران^[۱۵]، ۲۰۰۵). در میان مقالات و کتب نیز، تنها تعداد محدود و ناچیزی به موضوع رفتار شهروندی سازمانی پرداختهاند( اپلاتکا^[۱۶]، ۲۰۰۶). دلایل این امر از دو جهت قابل بررسی است؛ اول آنکه نقش مهم این متغیر، هنوز به طور کامل و گسترده درک نشده، و دیگر اینکه ممکن است بدیع بودن و بومی نشدن آن در مدارس، انگیزههای پژوهش زیادی را ایجاد نکرده باشد( زین آبادی و همکاران، ۱۳۸۷).
یکی از ابعاد اساسی و بنیادین هوش معنوی در سازمان احساس معنادار بودن و هدف داشتن در کار است. از منظر این بعد، معنویت در سازمان تنها این نیست که مورد علاقه و چالش برانگیز باشد، بلکه باید در جستجوی معنا و هدفی عمیقتر در کار بود. امروزه کارکنان در هر جا که فعالیت میکنند، چیزی فراتر از پاداشهای مادی در کار جستجو میکنند. آنان در پی کاری بامعنا، امیدبخش و خواستار اهداف متعالی در زندگیشان هستند، سازمانها، با کارکنان رشد یافته و بالندهای مواجهند که در پی یافتن کاری بامعنا، هدفمند و پرورش دهنده هستند.
این تحقیق به بررسی رابطه هوش معنوی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی میپردازد. پرسش اصلی تحقیق اینکه« چه رابطهای میان هوش معنوی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه وجود دارد؟» میباشد. این تحقیق میخواهد نشان دهد که جایگاه موضوع ارتباط هوش معنوی با رفتار شهروندی سازمانی در آموزش و پرورش بیش از سایر سازمانها مهم است، و به دلیل کمبود پژوهش در این زمینه، خود آشکار کننده نیاز مدیریت آموزش و پرورش به این تحقیق میباشد.
۱-۳- اهمیت وضرورت تحقیق
شرایط کاملاً متحول سازمانها، افزایش رقابت و لزوم اثربخشی، نیاز سازمانها را به نسل باارزشی از کارکنان، بیش از پیش آشکار نموده است؛ نسلی که از آنها به عنوان سربازان سازمانی^[۱۷]یاد میشود این کارکنان بیتردید، وجه ممیز سازمانهای اثربخش از غیر اثربخش هستند؛ زیرا سازمان را موطن خود میدانند و برای تحقق اهداف آن، بی هیچ چشم داشتی افزون بر نقش رسمی خود عمل نموده و از هیچ تلاشی دریغ نمیکنند (رامین مهر و همکاران، ۱۳۸۸).
مدارس برای مواجهه با شرایط و مقتضیات حاکم و بهرهمندی از معلمانی با رفتار شهروندی سازمانی، نیازمند مهارتها، تواناییها و ویژگیهایی بالاتر و متفاوتتر از وضعیت موجود میباشند. از عوامل موثر در رفتار شهروندی سازمانی کارکنان میتواند هوش معنوی آنان باشد. زمانی که هوش معنوی با زندگی کاری معلمان پیوند بخورد، نیروی قدرتمندی حاصل میشود که افراد تقریباً با هزاران ساعت کار میتوانند لحظات لذت بخشتر، متوازنتر و معنادارتری را تجربه کنند( فتاحی و همکاران، ۱۳۸۵).
ضرورت این مسئله زمانی آشکارتر میشود که بدانیم در سازمانهای امروزی، حداکثر کردن عملکرد منابع انسانی درون سازمان و ارتباط صحیح آنها با محیط، اهمیت بسیار زیادی پیدا کرده و در اولویت رسالتهای بسیاری از سازمانها، قابل رویت میباشد. بنابراین ارگانهای مختلف به ویژه سازمانها در کشورهای جهان سوم؛ که نیازمند جهشی عمده در کارآمدی هستند؛ باید زمینه را طوری فراهم کنند، که کارکنان و مدیرانشان با طیب خاطر، تمامی تجربیات، تواناییها و ظرفیتهای خود را در جهت اعتلای اهداف سازمانی به کار گیرند. این امر میسر نمیشود مگر اصول و قواعد مربوط به رفتار شهروندی سازمانی، شناسایی و بسترهای لازم برای پیادهسازی آن فراهم گردد. یکی از بسترهای بااهمیت که میتواند در ارتقای رفتار فرانقشی کارکنان مؤثر واقع شود برخورداری کارکنان از هوش معنوی است( هادی زاده مقدم و فرجیان، ۱۳۸۷).
ازاینرو به جهت اهمیتی که در بالا به آن اشاره شد و به خاطر کاربردی بودن نتایج تحقیق در سازمانها، کمپژوهی و کافی نبودن مطالعات داخلی درباره این موضوع، اهمیت روزافزون حوزه پژوهش در سازمانها و جایگاه مناسب مفهومی و نظری آن در حوزه های نوین رفتاری، این تحقیق دارای ضرورت انجام شدن و پایگاه علمی مناسب است.
۱-۴- اهداف تحقیق
۱-۴-۱- هدف آرمانی
ارائه راهکارهایی برای بهبود رفتار شهروندی سازمانی کارکنان و معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی.
۱-۴-۲- هدف کلی
شناخت رابطه هوش معنوی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی.
۱-۴-۳- هدف ویژه
تبیین رابطه تفکر انتقادی وجودی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی.
تبیین رابطه آگاهی متعالی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی .
تبیین رابطه معناسازی شخصی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی .
تبیین رابطه گسترش خودآگاهی با رفتار شهروندی سازمانی معلمان مقطع متوسطه شهرستان گرمی .
۱-۴-۴- هدف کاربردی
مدیران و کارکنان آموزش و پرورش شهرستان گرمی و دانشجویان علاقهمند به مطالعه دراین حوزه میتوانند از نتایج تحقیق بهرهمند گردند.

۳۶/۳
۲۵/۳
۲۰/۳
۶۸/۲
۶۱/۲
۵۶/۲

۷
۸
۹
۱۰
۱۱
۱۲
۱۳
۱۴
۱۵
۱۶

طیف لیکرت: ۱=خیلیمخالفم، ۲=مخالفم، ۳=نظری ندارم، ۴=موافقم، ۵=خیلیموافقم
۱۴-۲-۴ اولویتبندی گویه های تمایل گندمکاران در خصوص استفاده از نهادههای زیستی همانگونه که در جدول شماره ۱۴-۴ مشاهده میشود تمایل پاسخگویان در خصوص استفاده از نهادههای زیستی براساس میانگین رتبهای اولویتبندی شده است. از میان ۷ گویهای که به منظور سنجش تمایل پاسخگویان در خصوص استفاده از نهادههای زیستی در پرسشنامه استفاده گردید، گویه های “من قصد دارم از کود حیوانی کاملا پوسیده برای افزایش سلامت محصولات کشاورزی استفاده کنم “دارای بیشترین امتیاز و “من قصد دارم برای از بین بردن علفهای هرز از سموم شیمیایی استفاده نکنم” دارای کمترین امتیاز از دیدگاه پاسخگویان شدند. نتایج جدول نشان میدهد پاسخگویان تمایل به استفاده از نهادههای زیستی از جمله کودهای حیوانی کاملا پوسیده و منابعی که در خود مزرعه وجود دارد مانند کاه و کلش، علوفه خشک، برگ و بقایای محصول دارند، همچنین تمایل دارند هزینههایی را که جهت خرید سم و کود شیمیایی پرداخت میکنند با بهره گرفتن از نهادههای زیستی کاهش بدهند. در واقع استفاده بیش از حدکودهای شیمیایی، عملکرد گیاهان زراعی را کاهش میدهد و این کاهش به علت اسیدیشدن خاک، کاهش فعالیتهای زیستی خاک، افت خصوصیات فیزیکی خاک و عدم وجود ریزمغذی ها در خاک میباشد و در بسیاری موارد کاربرد کودهای شیمیایی باعث آلودگیهای محیطی و صدمات بومشناسی میشود که خود هزینه تولید را افزایش میدهد که برای کاهش این مخاطرات باید از منابع و نهادههایی استفاده کرد که علاوه بر تأمین نیازهای فعلی گیاه، پایداری کشاورزی در درازمدت را نیز به دنبال داشته باشد. نهادههای زیستی سازگاری بیشتری با محیطزیست داشته و نسبت به کودهای شیمیایی مقرون به صرفه بوده و هزینه کمتری را نسبت به کودهای شیمیایی در بر میگیرند و قیمت پایین این کودها، ضمن کمک به اقتصاد زارع، اثرات مخربی نیز بر روی محیطزیست ندارند. در واقع نهادههای زیستی علاوه بر برطرف کردن عوارض نامطلوبی که در پی مصرف کودهای شیمیایی ایجاد میشود، سبب حذف پرداخت قیمتهای بالا برای کودهای شیمیایی توسط کشاورز میشوند و سبب صرفهجویی در هزینه ها از طریق افزایش قیمت فروش تولیدات ارگانیک میشوند.

جدول ۱۴-۴ وضعت تمایل گندمکاران در خصوص استفاده از نهادههای زیستی

گویه ها

خیلی مخالفم

مخالفم

نظری ندارم

موافقم

خیلی موافقم

میانگین رتبهای

اولویت

من قصد دارم از کود حیوانی کاملا پوسیده برای افزایش سلامت محصولات کشاورزی استفاده کنم

۹

۱۱

۲۷

۱۰۰

۱۰۱

۱۰/۴

۱

من قصد دارم با بهره گرفتن از کودهای آلی و زیستی هزینه های خرید سموم و کودهای شیمیایی را کاهش بدهم.

۱۱

۱۰

۳۶

۸۷

۱۰۴

۰۶/۴

۲

من قصد دارم از منابع درون مزرعه، برای تولید محصول گندم استفاده کنم

۲-۲.صاحب جامع‌الرواه
وی این عالم دوره صفویه را اینطور توصیف می‌کند: «محمّدطاهربن محمّدحسین قمی، امام، علامه، محقق مدقق، جلیل القدر و عظیم الشأن، باهوش، ثقه و مورد اعتماد، دارای حافظه قوی، چشمه جوشان دین، محکم در اموردین، مناقبش و فضایلش قابل شمارش نیست، و خدا اورا بهترین جزای محسنین عطا کند واو دارای کتب نفیسی است».^[۴۹]
۲-۳. صاحب معجم رجال الحدیث وتفصیل طبقات الرواه
وی دربحث راوی و ثقه بودن ملا محمّدطاهر، حدّ را به کمال رسانیده و از ایشان به عنوان ثقه ثقه نام می‌برد.
۲-۴.میرزا عبدالله افندی‌اصفهانی
صاحب ریاض العلما وحیاض الفضلا؛ محمّدطاهررا اینطورمعرفی می‌کند: «مولی محمّدطاهر فرزند محمّد حسین شیرازی نجفی قمی از بزرگان فضلا معاصر، عالم، محقق دقیق ، ثقه ثقه، متکلم، محدث، جلیل القدر و دارای رفعت شأن».^[۵۰]
۲-۵.از زبان شاگرد
یکی از کسانی که به صراحت شاگردی خود رانزد ملامحمّدطاهر‌قمی‌بیان کرده صاحب رساله اصول اعتقادات^[۵۱] است.این کتاب مشابه کتاب منهج النجات محمّدطاهر است.این رساله برپنج حدیقه که دراصول دین است مشتمل بوده وهرحدیقه مشتمل برچند ثمره می‌باشد.شاگرد ملامحمّد طاهر درجای جای این رساله ازاستاد خود با عباراتی مثل؛ «نعم ماقال استادی الفاضل الماهر»، «نعم ماقال استادی العلامه القهامه الماهر رضوان الله علیه» ودرجای دیگر تمجید را به نهایت رسانده ومی‌گوید: «نعم ماقال معلّمی الفاضل الماهر مولانامحمّدطاهرحشره الله مع ائمه الطاهرین وحشرنی فی تراب قدمه یوم یقوم الناس لرب العالمین».(پیوست۱)
۳.مناصب ملامحمّدطاهر‌قمی
ملامحمّدطاهرازجمله علما‌ وفقهای دوره صفویه است که دارای مناصب متعددی بوده، منصب شیخ الاسلامی ازمعتبرترین مناصب این دوره است.ملامحمّدطاهرعلاوه بر شیخ الاسلامی منصب قضاوت و امامت جمعه قم رانیز بیش ازسه دهه برعهده داشته که این مناصب بنابرآنچه محمّدطبیب مؤمن گفته با فراز ونشیب هایی همراه بوده است.
نصرآبادی ‌درتذکره راجع به منصب شیخ الاسلامی محمّدطاهرمی‌گوید: «شیخ، فضیلت و صلاحش از انوار الهی روشن وخاطرش از شعاع خورشید حقیقت وادی ایمن تقوا و صلاح او به مرتبه‌ای است که محتاج به تقریر نیست، شیخ الاسلام قم‌اند واهل آن ولایت به هدایت امر و نهی او همگی طریق پرهیزکاری پیش گرفته‌اند پا از جاده‌ی صلاح بیرون نمی‌گذارند».^[۵۲]
محدث نیشابوری درکتاب منیه‌المرتا می‌گوید: ملامحمّدطاهرقمی ازبزرگان ازمحدثین متأخر است همچون مقدس اردبیلی در ورع وزهد در حالی که درطریقه و روش احکم ازمقدس اردبیلی بود وسلوک سالم‌تری داشت(أسلمُ مَسلکاً)از مشاهیرعلما زمانش، شدیدالتعصب بر صوفیان، فرقه‌های ملحد، تارکین نماز جمعه بود امام جمعه و جماعت بود در قم و شیخ الاسلام بود.
صاحب معجم المؤلفین نیز در معرفی ملامحمّدطاهرقمی می‌گوید: «فقیه اصولی، محدث، متکلم، ناقد نشأ بالنجف و اعطی امامه الجماعه و مشیخه‌الاسلام فی قم».^[۵۳]
۴.اساتید ملامحمّدطاهرقمی
۴-۱.سید علی بن الحسن الجباعی.این فقیه مجاهد درطی کردن پله‌های ترقی، خود راوامدار بزرگانی می‌داند که فقه آل محمّد (صلی‌الله وعلیه وآله) راگسترش دادند ازجمله این افراد می‌توان به سید علی بن ابی الحسن الجباعی (۱۰۶۸ق) اشاره کرد.گفته شده که ملا محمّدطاهردر یک سفر معنوی به مکه ،اجازه روایت را از او اخذ کرده است.^[۵۴]
۴-۲.محمّدبن جابر بن عباس نجفی
فخرالدین بن محمّدطریحی (۱۰۸۵ق)ازدیگراساتیدی که محمّدطاهرکه ازآنها اجازه روایت دریافت کرده است.درکتاب مجمع البحرین ازشاگردان فخر الدین محمّدطریحی نام می‌برد که ازمولی محمّدطاهربن محمّدحسین شیرازی قمی‌متوفای (۱۰۹۸ق) نیزبه عنوان روایت کنندگان از وی، نام برده شده.^[۵۵]
۴-۳.سید نورالدین علی عاملی.وی برادرپدری سیدصاحب مدارک و برادرمادری شیخ حسن صاحب معالم می‌باشد، که از اساتید ملامحمّدطاهربوده است.
۴-۴.مشایخ اجازه ملامحمّدطاهرقمی
ملامحمّدطاهردرضمن فایده ای درپایان کتاب «حجه الاسلام» طریقه اتصال خود رابه مشایخِ روایت بیان می‌کند.مانیز این طریق را باحفظ حدود دراین قسمت ذکرمی‌کنیم.«فایده فی ذکر طریقتنا الی المشایخ والی کتبهم الاربعه المتواتره التی مدحتهما بمنذین الرباعیین اللطیفین:
دین را کتـب اربعـه چـون جان باشد ایـن چـار چــهار رکـن ایـمان باشـد
هنگام جــهاد نفس این چـار کتــاب چـار آیـنــه صــاحب عـرفان بـاشـد
ای آنکه ترا غلط روی عادت خوست روکـن بـر هی که منزل رحمت است
میـخون کتب اربعـه کزوی هـر سطر راهیست که راست می رودتادردوست
قدرویت هذه الکتب الشریفه الرفیعه اجاز من السیدالجلیل النبیل الفاضل الکامل العالم العامل العلامه الفهامه التقی النقی الرضی السید نورالدین بن السیدعلی العاملی عاملهما الله بفضله عن اخویه امامی الفضل والتحقیق اعنی السیدالعالم الاوحدشمس الدین محمّدبن السید مؤلف المدارک فی شرح الشرایع والفاضل العلامه جمال الدین حسن مصنف کتاب المعالم ولدالمحقق الشیخ زین الدین رحمهما الله وهما یرویانهاعن شیخهما الجلیل السیدعلی بن ابی الحسن ولدالسیدمحمّد والسیدنور الدین رحمهم الله عن شیخ زین الدین المذکورعن شیخهما الفاضل علی بن عبدالعالی العیسی عن الشیخ شمس الدین محمّدبن المؤذن ابخرینی عن الشیخ ضیا الدین علی بن شیخ الشهید محمّد بن مکی عن والده عن شیخ فخرالدین محمّدبن العلامه جمال الدین الدحسن بن یوسف بن علی المطهر عن والده عن شیخ المحقق نجم الحله والدین ابوالقاسم جعفربن الحسن بن یحیی بن سعید عن السید شمس الدین ابی علی فخاربن معد الموسی عن الامام ابی الفضل شاذان بن جبرئیل القمی نزیل مهبط الوحی ودار هجره رسول الله (صلی‌الله‌علیه‌وآله) عن الشیخ عماد الدین محمدبن ابی القاسم الطبری عن ابی علی الحسن بن ابن جعفر عن محمّدبن الحسن الطوسی مؤلف التهذیب والاستبصار عن والده عن الشیخ ابو عبدالله المفید عن ابی القاسم جعفربن محمّد بن قولویه الفقیه القمی عن محمّدبن یعقوب الکلینی مؤلف الکافی والشیخ المفید یروی عن محمّد بن علی بن بابویه مؤلف من لایحضره الفقیه.وقد یکون الواسطه بین الطوسی و ابن بابویه ابا عبدالله الحسین بن عبیدالله الخضایری و قد یکون غیرهما کما هو مقرر فی محله والمستوفی فی بابه و روینها اجازه و بعضها قراءه عن الشیخ الفاضل العالم العامل التقی النقی محمّد بن شیخ الفاضل التقی جابر بن عباس (قدس‌الله روحها)عن ابیه عن الشیخ الجلیل السید محمّد بن السید علی عن والده عن شیخ الجلیل النبیل الشهید الثانی زین الدین اعلی الله درجته عن شیخه المرحوم المبرور علی بن عبدالعالی المیسی.
و[حینئذ] عن الشیخ محمّد بن جابر المذکور عن السید الجلیل النبیل الفاضل العالم العامل شرف الدین علی الفارسی فی مشهد المقدس الغروی رحمه الله شیخ الفاضل التقی السید فیض الله عن شیخ الجلیل الشیخ حسن بن ابی الحسن الشهید الثانی عن الشیخ علی بن عبدالعالی العیسی و عن الشیخ محمدبن عبداللحبار البحرانی عن علی بن محمّدالقطیفی عن میرزا محمّد الاسترآبادی الرجالی عن الشیخ ابراهیم بن الشیخ علی بن عبدالعالی المیسی عن والده المذکور و عن الشیخ محمّد المذکور ایضاً عن الشیخ الجلی لمحمّد بن الحارث عن الشهید الثانی عن الشیخ عبدالعالی العیسی و هو روی عن الشیوخ المذکوره فی السند الاول الی مؤلفی الکتب الاربعه».^[۵۶]
۵.شاگردان
دراین قسمت به معروفین از شاگردان محمّدطاهر وهمچنین کسانی که ازوی اجازه روایت دریافت کرده اند اشاره می‌کنیم.
۵-۱. علامه مجلسی
ملامحمّدطاهردارای شاگردانی بزرگ وصاحب نام بوده است.وی ازاساتید اجازه روایت علامه ملامحمّدباقرمجلسی (۱۱۱۰ق) بوده است.درکتاب بحارالانوار ازاساتید علامه مجلسی نام برده شده که می‌گوید: «از اساتید اجازه، مولی محمّدطاهربن محمدحسین شیرازی شیخ الاسلام شهر قمِ شریف است که صاحب کتاب حجه الاسلام است، که جدّ سادات جلیل القدر که معروف به طاهریین از طرف مادر، که این اجازه در سال ۱۰۸۶ قمری از ایشان صادر شده».^[۵۷]
۵-۲.شیخ‌حرعاملی.ازدیگر شاگردان روائی این عالم، شیخ حرعاملی است.شیخ حر در«اثبات الهداه بالنصوص و المعجزات»از ملامحمّدطاهرقمی روایت نقل می‌کند.^[۵۸]
۵-۳. شیخ نورالدین‌الاخباری.وی نیز ازجمله کسانی است که شاگردی ملامحمّدطاهرقمی کرده است.اجازه استادش به خط استادش درپشت کتاب الوافی است آن طور که شیخ رازی ذکر کرده.^[۵۹]
۵-۴.ملامحسن‌فیض‌کاشانی.محمّدمحسن بن شاه مرتضی معروف به فیض کاشانی(۱۰۹۱ق) از بزرگانی است که نامش درزمره شاگردان ملامحمّدطاهرثبت شده است.درکتاب نوادر الاخبار ازمشایخ فیض نام برده شده که به علمایی چون ملاخلیل قزوینی(۱۰۸۹ق) وشیخ بهایی( ۱۰۳۰ق) ^[۶۰]وملا محمّد طاهرقمی اشاره شده است.^[۶۱]
۶.معرفی‌آثار
آثارملامحمّدطاهرقمی با توجه به تتبعی که در مراکز نگهداری نسخ خطی شده به ۵۵ مورد رسیده است.این آثار را می‌توان درچند بخش معرفی کرد.آثارضدتصوفی وضد حکمی، آثار منسوب به وی درنقدتصوف، آثارکلامی واعتقادی، آثارمواعظی واخلاقی، آثارفقهی وآثاری درفضائل ومناقب ائمه (علیهم‌السلام) وهمچنین شعر.محمّدطاهرچه دردوره خود وچه دردوره های بعدی فقط با آثار ضد تصوفی شناخته شده است، درحالی که وی صاحب بیش از۵۵ اثراست.تعداد اندکی ازآثار ملا محمّد طاهرچاپ شده که می‌توان به ردصوفیه، تحفه الاخیار، مونس الابرار وسفینه النجات اشاره کرد.از آنجا که محمّدطاهر منصوب حکومت بوده است آثار وی قریب به اتفاق، شاید^[۶۲]هم تماماً حفظ شده وکتابی مثل تحفه عباسی با۲۶نسخه وحکمه العارفین با۲۱نسخه موجود می‌باشد.اما این وضع را درآثار میرلوحی مشاهده نمی‌کنیم.ادبیات این آثار بعضا (آثارضدتصوف وفلسفه) از مدار نقد صحیح خارج شده، ودردیگر آثار، ادبیات آنها ادبیات روان و بخصوص دررساله «حجه الاسلام» و«حکمه العارفین» ادبیاتی استدلالی است.درمعرفی آثار وی برای خارج نشدن از شیوه تحقیق صرفا ازکلمات خود مؤلف استفاده می‌کنیم.

( اینجا فقط تکه ای از متن فایل پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

نکته ای که درآثار ملامحمّدطاهربه طور مشخص به چشم می‌خورد، حداقل در۲۰ اثری که دیده شده، وی درابتدای اکثرآثار، هم غرض ازتألیف وهم اسم آن اثر وازهمه مهمتر نام مؤلف اثر را نیز ذکر می‌کند.بیان فهرست مطالب اثر نیز از دیگرخصوصیات آثارملامحمّدطاهر‌است.مثلا؛ این اثر دارای چندفصل یاچند فایده وخاتمه می‌باشد. برای روشن شدن این نکات، دو نمونه را ذکر می‌کنیم.مثلاً درابتدای کتاب حکمه العارفین می‌گوید: «فلما رایت الناس قد ترکوا الحق و مالوا الی الباطل ورفضوا الباقی واختارالفانی الزایل وترکوا التمسک بالآل وکتاب الاله المتعال وتشبثوا باذیال ائمه الضلال واستحبوا ماسطروه بالوهم والخیال فتبعوا آرا الفلاسفه الذین هم فی الوسوسه بمنزله الابالسه فصاروا فرقا شتی فاختار بعضهم مذهب المتاخرین من الفارابی وابن سینا وامثالهما وسلک بعضهم مسلک افلاطن وارسطو واضرابهما من الیونانیین والملطیین الضالین المضلین وذهب بعضهم مذهب المتصوفین وتبع بعضهم آثار المبتدعین من المتکلمین صنّفت هذا الکتاب فی بیان عثراتهم وزلّاتهم فی المسائل المتعلقه بالدین،وسمیته حکمه العارفین فی دفع شبهه المخالفین ورتّبه علی مقدمه وفصول وخاتمه».^[۶۳]وهمچنین درابتدای منهج النجات می‌گوید: «این داعی دولت قاهره محمّد طاهر این رساله را از برای انتفاع مؤمنان و محبان دین و ایمان تألیف نمود. رباعی چند که در معارف الهیه و اصول مذهبیه شیعه اثنی عشریه که فرقه ناجیه اند در ایام جوانی به نظم در آورده بود و بر آن شرحی نوشت و به دلیل عقل و نقل ایشان مطالب آن نمود و آن را ختم گردانید به صورت نماز حضرت صادق (علیه‌السلام) که از برای تعلیم حماد بن عیسی… این رساله را بر هشت باب، موسوم ساخت آن را به منهج النجات…».^[۶۴]
۶-۱.تألیفات‌ضدتصوفی
آثاری که محمّدطاهردرنقد تصوف و فلسفه تألیف کرده از بارز ترین آثار این عالم است.وی در دوره صفویه با ردیه نویسی‌هایی که دربرابراعتقادها ورفتارهای صوفیان وفلاسفه از خودبه جا می‌گذاردبه یک چهره ضدصوفی، تبدیل می‌شود، ملامحمّدطاهربا تالیف‌کتاب‌های همچون «ردصوفیه»، «تحفه العقلا»، «تحفه الاخیار»، «حکمه العارفین»،«رجم الشیاطین»و«الفوائدالدینیه» درمقابل کسانی که به اعتقادوی به مرزهای بدعت واردشده، تالیفات خود راسدی دربرابر آنها می‌داند.
۶-۱-۱.رساله رد صوفیه
این رساله ازجنجالی ترین تألیفات محمّدطاهرقمی‌درمخالفت با تصوف است.تألیف این رساله باعث می‌شود که محمّدتقی مجلسی^[۶۵] جوابی براین رساله بنویسد ومحمّدطاهرهم ردی بر جواب مجلسی بنویسد.محمّدطاهر دراین رساله عمده انتقاداتش را نسبت به صوفیه مطرح کرده وصرفا به مباحث ضدتصوفی پرداخته است.دراین اثراز رفتارها وگفتارهای بایزید، حلاج، علاءالدوله سمنانی، محی الدین و عطاربه عنوان بدعت سخن به میان آورده و مستحق تکفیر می‌داند.درانتهای رساله به بیست فرقه از فرقه‌های صوفیه اشاره می‌کند.از جمله : باطنیه، نوریه، الهامیه، کاملیه، تلقینیه، مشارکیه، تسلیمیه.(پیوست ۲)
نسخه شماره(۵۴۶۸)کتابخانه مجلس شورای اسلامی ازاین رساله ناقص بوده ونسخه عکسی شماره (۲/۶۳) مجمع ذخائراسلامی که به عنوان رد صوفیه ذکرشده، صحیح نمی‌باشد واحتمالا کشف الاسرار باشد.^[۶۶]
۶-۱-۲.رجم الشیاطین
این اثر مهم ملامحمّدطاهر قمی مفصل ترین کتاب وی درنقدتصوف است.دراین رساله بیشترین انتقادها به ملای روم ، عطار، حلاج، بایزید وابن عربی است.این رساله به دو نام تحفه الاخیار و همینطور رجم الشیاطین درنسخه شماره(۱۵۵۴۸) کتابخانه مجلس شورای اسلامی به ثبت رسیده است.اما آنچه که ازنسخه دیگر تحفه الاخیار به شماره (۱۴۷۴۳)کتابخانه مجلس شورای اسلامی از برگ۴۹‌به بعد، معلوم می‌شود که ‌نسخه شماره (۱۵۵۴۸) نمی‌تواند تحفه الاخیار باشد.زیرا تحفه الاخیار صرفاًشرح قصیده مونس الابرار است.ملامحمّدطاهردراین شرح تمامی قصیده مونس الابراررا به صورت جداجدا آورده وشرح کرده است.رساله رجم الشیاطین ازابتدا تا انتها وبرمبنای کفراهل این طایفه وبدعتی بودن افعال آنهاپیش رفته.^[۶۷](پیوست ۳)درحالی که تحفه الاخیارشرح قصیده مونس الابرار بوده وتمامی قصیده درشرح وجود داشته وحال آنکه دررجم الشیاطین ازچند بیتِ آن بیشتر استفاده نکرده.اما اینکه عمده اشکالات محمّدطاهر دراین کتاب چیست و چه اصولی ازتصوف را به چالش کشیده، دربخش اندیشه های ضد تصوفی ملامحمّدطاهر به تفصیل ذکر خواهیم کرد.
۶-۱-۳.مونس‌الابرار
ملامحمّدطاهر درایام جوانی قصیده ای به نام مونس الابرار سروده است.این قصیده درمدح حضرت امیر المؤمنین علی (علیه‌السلام)می‌باشد.وی دراین رساله بطورضمنی به نقدصوفیان پرداخته ودرباره آنان می‌گوید:
جـمیع پیـروحلاج وبـایزیدوجنـید تمـام بـی خبران شرع احمدمختار
زجهل درهمه عمرخویش درره دین نمـی رونـدبــه طرزائمـه اطـهـار
کننددعـوی تسخیر جنـیان به دروغ کـه تـاکـنندالاغـان انـس راافـسار
زنـنددسـتک ورقصنـدای مسلـمـان نهیـدپـنبه به گوش وکنـیداستغفار
زنـندچرخ وزجهلش نهندطاعت نام کننددین خدارابه لعب وبازی خوار
نمی رسـندبـه جایی اگرتمامی عمـر زنـندچـرخ پـیاپی چـواشـترعصار
کننـدعاشـقی امـردان ومـی گویـنـد بودمجازپل عشـق حـضرت جبـار

معاون پژوهشی
دانشگاه آزاد اسلامی
واحد علوم و تحقیقات هرمزگان
چکیده
اصلی ترین هدف این تحقیق،توضیح ساز وکارهای حقوقی قانون نظارت برنمایندگان مجلس شورای اسلامی است،موضوع اصول ۸۵،۸۶،۸۴،۵۶،۷۱قانون اساسی جمهوری اسلامی،ایران است. این پدیده حقوقی از خردادسال۸۹ ۱۳به جامعه حقوقی ایران معرفی شد.که ضرورت توجه حقوقدانان وپزوهشگران رابه خود جلب می کند. پس از اثبات ضرورت نظارت بر نمایندگان مجلس، آنچه مورد بحث و گفتگوی بسیاری از اندیشمندان قرار گرفته، اینکه آیا نمایندگان مجلس شورای اسلامی نظارت پذیر می‌باشند، قلمرو این نظارت چیست و معیارهای ارزیابی نمایندگان کدام است. مردم پس از انتخاب نمایندگان توان نظارت را دارا هستند یا خیر، وظایف نمایندگی چیست، در صورت از دست دادن شرایط نمایندگی چه کسانی یا چه نهادی می‌تواند انعزال نماینده را اعمال نمایند. نمایندگان مجلس موظفند براساس اصول قانون اساسی جمهوری اسلامی‌به اعمال این وظیفه بپردازند. تحقیق حاضر شامل سه فصل است که در آن به مفهوم و مبانی نظارت، صلاحیت‌های ذاتی نمایندگان و نظارت بر قدرت و معیارهای ارزیابی نمایندگان، سوابق نظارت بر قدرت نمایندگان درچند نمونه از نظام‌های سیاسی و ساز و کارهای این نظارت در نظام جمهوری اسلامی ایران پرداخته شده است.
فصل اوّل
کلیات
مقدمه
عدالت بدون قدرت، ناتوان است، قدرت نیزبدون عدالت خودکامگی است.^[۱]
جایگاه برجسته و حساس مجلس شورای اسلامی‌‌درحقوق اساسی وساختارکلی نظام جمهوری اسلامی جایگاه ویژه‌ای رابرای نمایندگان مجلس شورای اسلامی‌‌رقم زده است.

( اینجا فقط تکه ای از متن پایان نامه درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

به گونه‌ای که نظارت برنمایندگان و انتخابات وتعیین صحت وسقم آن ازاهمیت خاصی برخورداربوده وسازوکارنظارتی پیوسته محل بحث ومنا قشه بوده است.رسیدگی به اعتبار نامه نمایندگان مجلس توسط خودمجلس به عنوان یکی ازساز وکارهای نظارتی ونظارت شورای نگهبان هردودرقانون اساسی به صراحت آمده است.
طرح نظارت بر نمایندگان یکی از پربحث​ترین مصوبات مجلس هشتم است که پس از مدت‌ها مذاکره و بحث و بررسی به تصویب رسید. در نظام‌های سیاسی پیچیده امروز، نظارت امری ضروری و گریز ناپذیراست.منتها نوع نظارت ونظام آن، در کشور‌های مختلف بسیار متفاوت است. دراین پایان نامه به واکاوی آن میپردازیم.
بیان مساله
نمایندگان از آن جهت که امانت‌دار ملت در امور سیاسی و تقنینی هستند، مسؤولیت سنگینی برعهده دارند. انتظارات مردم و منافع جامعه در معرض کردار و رفتار نمایندگان قرار می‌گیرد. کمترین ناتوانی، مسامحه، عدم‌دقت و توجه و نادیده گرفتن ارزش‌های اخلاقی، عقیدتی، حقوق و آزادی‌ها و انتظارات جامعه، ممکن است خسارات جبران‌ناپذیری را وارد سازد. بدین جهت، نظارت بر اعمال و رفتار نمایندگان امری منطقی به‌نظر می‌رسد.

NaCl

۰۵/۰

عصاره مخمر

۰۵/۰

تهیه زیست توده برای مطالعات فیلوژنتیک

سویه‌های اکتینومیست منتخب در محیط تهیه شده در بخش ‏۳-۲۰-۱- کشت داده شد و در شیکر انکوباتور^OC28 با دور rpm220 گرماگذاری شدند. پس از ۴۸ ساعت از ارلن‌ها لام گرفته شد و رنگ آمیزی با کریستال ویوله انجام شد و از آلوده نبودن ارلن‌ها اطمینان حاصل شد، توده‌زیستی باکتری‌ها با کمک سانتریفوژ از محیط کشت جدا شد. توده‌زیستی دو بار با آب مقطر شستشو داده شد و آب، کاملا خارج گردید. برای اطمینان بیشتر، ویال‌ها ۱۵ تا ۲۰ دقیقه با درپوش باز زیر هود قرار داده شدند.
استخراج DNA
استخراج DNA، طبق روش Saltingout پیشنهاد شده توسط Kisser و همکاران با کمی تغییر مورد استفاده قرار گرفت (۳۶). برای این منظور، ابتدا محلول‌های زیر تهیه شد:
SET buffer: Tris-HCl20 میلی مولار، EDTA 25میلی مولار با۸ pH، NaCl 75 میلی‌مولار
محلول لیزوزیم ۰۵/۰ گرم در میلی‌لیتر
محلول SDS(سدیم دودسیل سولفات) ۱۰%
محلول سدیم استات ۳ مولار با ۵ pH
۲۰۰-۱۰۰ میلی گرم از توده زیستی را در ویال ۵/۱ میلی‌لیتری ریخته شد و ۹۵۰ میکرولیترSet buffer و۵۰ میکرولیتر از محلول لیزوزیم افزوده شد و پس از ۵ ثانیه ورتکس، ویال در انکوباتور^ºC37 به مدت یک ساعت گرماگذاری شد. EDTA موجود در Set buffer از عمل نوکلئازها جلوگیری می‌کند و تریس، برای تنظیم pH لازم است. در طول این مدت ویال‌ها هر یک ربع یک‌ بار برای ۲-۵ ثانیه ورتکس شد. پس از پایان این مدت، محتوای ویال تقریبا به صورت همگن و لزج درآمد. سپس به ویال مورد نظر۱۰۰ تا ۲۰۰ میکرولیتر SDS10% افزوده شد و یک ساعت در حمام آب گرم با دمای ºC60 قرار داده شد. SDS لیپیدهای غشا را حل می کند. در پایان این مرحله محتوای ویال به صورت شفاف شد و محتوای سلولی از بین رفت. اجساد سلولی با بهره گرفتن از میکروفیوژ با دورrpm13500به مدت ۱۰ دقیقه از عصاره سلولی جدا شد. محلول رویی حاوی RNA،DNA و لیپید می‌باشد، این محلول به یک ویال ۵/۱ میلی لیتری تمیز انتقال داده شد و در زیر هود شیمیایی هم حجم محلول رویی جمع آوری شده، محلول فنل-کلرفرم اشباع با نسبت یک به یک اضافه شد. ویال حاوی محلول را در دست گرفته و به مدت دو دقیقه تکان داده شد، سپس سانتریفوژ در rpm13500 به مدت پنج دقیقه انجام شد. کلروفرم، لیپیدهای باقی مانده را حل کرده و فنل پروتئین‌زدایی می‌کند. در ادامه مجددا در زیر هود شیمیایی مایع رویی جمع آوری شد و به یک ویال ۵/۱ میلی‌لیتری انتقال داده شد و هم حجم محلول رویی جمع آوری شده، کلرفرم اضافه شد و دو دقیقه به آرامی با دست تکان داده شد، سپس پنج دقیقه در rpm13500سانتریفوژ شد. پس از انتقال محلول رویی به ویال تمیز دیگر، یک دهم حجم محلول داخل ویال، محلول سدیم استات ۳ مولار با ۵ pH و سه برابر آن اتانول ۹۶ % سرد اضافه شد و سی دقیقه در^ºC20- قرار داده شد. کدر شدن محتوای ویال پس از افزودن اتانول نشانه حضور DNA است.
پس از اتمام سی دقیقه و سانتریفوژ به مدت ۱۵ دقیقه با دور rpm15000 و خالی کردن الکل، رسوب سفید چسبیده به ته یا دیواره ویال با ۱۰۰۰-۵۰۰ میکرولیتر اتانول۷۰% سرد شستشو داده شد و سانتریفوژ با شرایط قبلی تکرار شد. سپس فاز الکلی خالی شد و برای آبگیری ویال ، به مدت ۱۰ تا ۱۵ دقیقه با درپوش باز روی کاغذ صافی در دمای محیط قرار داده شد. در مرحله آخر DNA حاصل در ۱۰۰-۵۰ میکرولیترآب مقطر استریل حل شد و تا زمان استفاده در ºC20- نگهداری شد.
تائید بررسی کیفیت استخراج DNA
به منظور بررسی موفق بودن عمل استخراج DNA، الکتروفورز با ژل آگارز ۱% انجام شد.
تهیه ژل آگارز
برای تهیه ژل آگارز ۱%، ۲/۱ گرم آگارز در ۱۲ سی سی بافر x TAE1 روی حرارت شعله حل شد. هنگامی که دمای محلول ژل آگارز در محیط به دمای ^ºC60-50 رسید، شانه را در ظرف الکتروفورز قرار داده و ژل در ظرف ریخته شد. پس ازکامل بسته شدن ژل، شانه را با احتیاط و به صورت عمودی خارج شد و ظرف ژل به تانک الکتروفورز حاوی بافر x TAE1 منتقل شد. بافر باید به اندازه ای باشد که کاملا روی چاهک ها را پر کند. سپس ۲ میکرولیتر از هر کدام از نمونه‌های DNA ژنومی استخراج شده با ۲ میکرولیترloading dye (رنگ) روی پارافیلم مخلوط شد و درون چاهک ها قرار داده شد. در یکی از چاهک‌ها نیز ۲ میکرولیتر شاخص وزن مولکولی^[۷۱] ، به منظور مقایسه سایز و غلظت نمونه‌های سایر چاهک‌ها با آن قرار داده شد. برای آماده سازی شاخص وزن مولکولی، آب مقطر، loading dye و شاخص وزن مولکولی به نسبت ۴:۱:۱ با هم مخلوط شد. پس از قرار دادن نمونه‌ها در داخل چاهک‌ها، الکتروفورز با جریان V/CM 7 به مدت ۳۰ دقیقه انجام شد. سپس ژل به ظرف حاوی اتیدیوم برماید g/mlμ۱ منتقل شد و پس از ۵ تا ۱۰ دقیقه، ژل با آب شستشو داده شد و در دستگاه ژل داک قرار داده شده و از آن عکس گرفته شد.
تهیه بافر Tris-acetate-EDTA(TAE)
برای آماده سازی بافر x TAE1، ابتدا بافرx TAE50 ساخته و با بهره گرفتن از آب مقطر به غلظت x1 رسانده شد. به منظور تهیه بافر x TAE50، به ۱۰۰ میلی لیتر محلول۰٫۵M EDTA با ۸ pH، ۵۷ میلی لیتر اسید استیک گلاسیال و ۲۴۲ گرم تریس قلیایی افزوده شد و حجم محلول با آب مقطر به یک لیتر رسانده شد.
انجام فرایند واکنش زنجیره پلیمراز(PCR)
پرایمر‌ها
پرایمرها باید دمای ذوب ™ نزدیک به هم و نیز دمای اتصال (Ta) مشابه با رشته الگو داشته باشند. برای ویژگی بیشتر بهتر است میانگین محتوای G+C آنها ۶۰-۴۰% باشد. وجود ساختارهای ثانویه (با ΔGمنفی اندازه‌گیری می‌شوند) چه در ناحیه اتصال با پرایمر و یا ناحیه فرودستی و یا ناحیه فرادستی رشته الگو در تکثیر کارا تداخل ایجاد می‌کند. توالی‌های پالیندرومی درون پرایمرها نباید دیده شود. غلظت ۵/۰-۱ میکرومولار پرایمر مناسب بوده و در غلظت‌های بالا محصولات غیر اختصاصی ایجاد شده و غلظت‌های کم منجر به رقابت در طویل شدن توالی‌های مکمل یا طویل شدن پرایمر می‌شود که درنهایت منجر به کاهش بازده محصول می‌شود.
برای تکثیر ژن ۱۶S rRNA باکتری‌ها از پرایمرهای عمومی (Universal) تغییر یافته استفاده شد. توالی پرایمرهای مورد استفاده در این پژوهش و دمای اتصال مربوط به آنها به ترتیب زیر است:
۹F: 5’- AAG AGT TTG ATC ATG GCT CAG -3’ (Tm:60)
۱۵۴۱R: 5’- AGG AGG TGA TCC ACC CGC A -3’ (Tm:60)
با بهره گرفتن از این پرایمرها ژن ۱۶S rRNA باطول حدود ۱۵۰۰ نوکلئوتید تکثیر می‌شود (۳۹ ).
شرایط واکنش PCR
برای تکثیر DNA از آنزیم Master Mixاستفاده شد. واکنش PCR طبق روش استاندارد انجام گرفت. دناتوره شدن اولیه در دمای ^oC96 و مدت زمان آن ۵ دقیقه بود.۳۰ چرخه تکثیر شامل ۴۵ ثانیه در دمای ^oC94، ۵۵ ثانیه در دمای^oC57 و ۷۵ ثانیه در دمای ^oC72 انجام شد. پس از این مراحل ۱۰ دقیقه دما در ^oC72 به منظور تکمیل نهایی سنتز DNA نگه داشته شد
بررسی محصولات PCR
در این مرحله نیز بررسی محصولات PCR با بهره گرفتن از ژل آگاروز۱% و دستگاه الکروفورز مطابق بخش‏۳-۲۰-۴- انجام شد.
خالص سازی محصولات PCR
خالص سازی محصولات PCR سبب حذف پرایمرها، نوکلئوتیدها، ترکیبات بازی، محصولات تکثیر شده ناخواسته و ترکیباتی که واکنش اتصال را مهار می‌کنند، می‌شود. مهمترین عیب آن از دست رفتن بخشی از محصول واکنش است. در هر صورت عدم انجام این مرحله ممکن است موجب باقی ماندن ناخالصی‌ها و کاهش کیفیت در مرحله توالی‌یابی شود، به همین منظور و نیز افزایش غلظت محصول، خالص‌سازی DNA حاصل از PCR این کار با بهره گرفتن از کیت خاص سازی (Geneall) انجام گرفت.
تعیین توالی نوکلئوتیدی قطعات تکثیر شده از ژن ۱۶S rRNA
محصولات خالص PCR به صورت یک طرفه و فقط با پرایمر۹F تکثیر شد. سپس برای تعیین توالی به شرکت ماکروژن (کره جنوبی) ارسال شد.
مقایسه توالی نوکلئوتید ژن ۱۶S rRNA سویه‌های اکتینومایست منتخب
برای بررسی نتیجه­ توالی­ها، توالی­های ژن۱۶S rRNA ، با بهره گرفتن از نرم­افزار BioEdit مرتب شده و سپس توسط برنامه­یChromas pro مورد بررسی قرار گرفت. برای شناسایی مولکولی سویه های برتر از انطباق توالی بدست آمده در EZ-Taxon Server Version 2.1 استفاده شد.
فصل چهارم:
نتایج
نتایج
دراین فصل نتایج مربوط به هر مرحله از فعالیت‌های پژوهشی به همراه بررسی‌های آماری آن ارائه می‌شود.
شرایط پیش تخمیر و تخمیر و میزان متابولیت تولید شده توسط۴۰ سویه اکتینومیست‌ بررسی شده در این پژوهش
نتایج مربوط به شرایط پیش تخمیر و تخمیر و مقدار متابولیت ثانویه تولید شده توسط ۴۰ سویه اکتینومیست، که به صورت تصادفی انتخاب شد، به همراه نتایج محاسبه انحراف معیار (SD)، pH محیط ‌های پیش تخمیر و تخمیر محاسبه شد و درجدول ۴-۱ نشان داده شده است.
جدول ‏۴‑۱:نتایج حاصل از مرحله ی تولید واستخراج متابولیت‌های ثانویه